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技術文章
谷胱gan肽檢測探針細胞染色介紹

還原型谷胱gan肽(GSH)的亞細胞檢測和定位對于了解氧化還原態(tài)的調(diào)節(jié)、藥物的作用效應以及脫毒機制方面十分重要。有文獻報道不同細胞亞群在應對氧化應激時的GSH水平存在差異,因此,適用于流式細胞分析和自動化熒光檢測的GSH檢測探針的開發(fā)非常重要。比較于常用的GSH檢測探針:單溴二胺(mBBr,MX5315)、單氯二胺(mBCl,MX5318),以及Thiotracker™ Violet,ThiolTrace™ Violet 500是一款更明亮和更穩(wěn)定的細胞內(nèi)硫醇探針(Thiol probe),用于監(jiān)測胞內(nèi)硫醇。由于GSH代表細胞內(nèi)的絕大多數(shù)游離硫醇,因此,ThiolTrace™ Violet 500能用來評估細胞內(nèi)GSH的水平。

優(yōu)勢:

1、比mBCl和其他常用的胞內(nèi)硫醇染料(比如:Thiotracker Violet)至少明亮10×;在含生長因子的細胞培養(yǎng)基內(nèi),ThiolTrace Violet 500比Thiotracker Violet的熒光強度高10-100倍(見附圖I)。

2、能用紫外(UV)或405nm波長激發(fā),最大發(fā)射波長~525nm(見附圖II)。

3、能用醛類固定和0.5% Triton X-100透化。

4、能用于多通路分析,包括細胞毒性研究。

5、兼容于各種稀釋溶液包括含血清的細胞培養(yǎng)基。

6、操作簡單,只需37℃孵育30min即可進入細胞內(nèi);

7、適用于多種檢測方法,包括:流式細胞術、HCS成像和落射熒光顯微鏡。


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