Cal-500 AM, 鈣離子熒光探針
簡要描述：
Cal-500 AM, 鈣離子熒光探針鈣離子測定在各種生理活動中發(fā)揮著重要作用，與鈣離子結(jié)合從而表現(xiàn)出光譜反應(yīng)的熒光探針使得研究人員能夠觀察胞內(nèi)游離鈣離子水平變化，通過熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀、熒光光度計和熒光酶標(biāo)板來檢測。
產(chǎn)品時間：2026-05-12
打印當(dāng)前頁Cal-500 AM, Cell Permeant 鈣離子熒光探針
產(chǎn)品標(biāo)簽
Cal-500 AM; Cal-520 AM;鈣離子熒光探針; Fura-2 AM; Fluo-8 AM; Rhod-2 AM; Ionomycin, Free Base離子霉素;
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 報價（元） |
Cal-500 AM, Cell Permeant鈣離子熒光探針 | MX4593-100UG | 2×50μg | 1080 |
Cal-500 AM, Cell Permeant鈣離子熒光探針 | MX4593-250UG | 5×50μg | 2580 |
Cal-500 AM, Cell Permeant鈣離子熒光探針 | MX4593-500UG | 10×50μg | 3880 |
產(chǎn)品描述
鈣離子測定在各種生理活動中發(fā)揮著重要作用，與鈣離子結(jié)合從而表現(xiàn)出光譜反應(yīng)的熒光探針使得研究人員能夠觀察胞內(nèi)游離鈣離子水平變化，通過熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀、熒光光度計和熒光酶標(biāo)板來檢測。
Cal-500是一款紫外激發(fā)的鈣離子熒光探針，最大發(fā)射波長~500nm。斯托克斯位移大于100nm。也能用405nm藍(lán)紫色激發(fā)器激發(fā)，中等鈣親和探針，Kd值~303nM。Cal-500的激發(fā)光譜和FITC、Alexa Fluor 488和GFP能良好的區(qū)分，因此，適合與GFP細(xì)胞系、FITC/AlexaFluor 488標(biāo)記的熒光素或其他紅色標(biāo)記的熒光素進(jìn)行多重標(biāo)記實驗。在CHO和HEK細(xì)胞中，Cal-500 AM具良好的細(xì)胞鈣響應(yīng)。
Cal-500 AM具有細(xì)胞膜滲透性，能夠預(yù)加載進(jìn)入細(xì)胞。一旦進(jìn)入細(xì)胞，AM基團被酯酶裂解，產(chǎn)生帶負(fù)電荷的熒光染料，留在細(xì)胞內(nèi)部。一旦與鈣離子結(jié)合后，它們的熒光顯著加強。一旦與鈣離子結(jié)合后，它們的熒光顯著加強。當(dāng)細(xì)胞被激動劑刺激后，受體發(fā)出細(xì)胞內(nèi)鈣釋放的信號，從而使得Cal-500的熒光增加。
保存與運輸方法
保存：-20℃干燥避光保存，有效期至少1年。
運輸：冰袋運輸。
產(chǎn)品特性
同義名：Cal-500, Acetoxymethyl Ester; | 分子量：1019.92 | 純度：≥90%（HPLC） |
解離常數(shù)：Kd=303 nM | 溶解性：DMSO | 外觀：固體 |
Ex/Em：388/482 | ||
注意事項
1） 熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
2） 乙酰氧基甲基酯（AM）易吸潮，冰箱取出后請在干燥的環(huán)境放至室溫后再開封。由于試劑微量，開封前請將其短暫離心，以保證粉末落入管底。
3） 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
A， 試劑準(zhǔn)備
1） 配制Pluronic F-127母液：稱取100mg Pluronic F-127粉末（貨號：MS4301-1G）中加入500μl DMSO，配制成20%(w/v) DMSO母液。溶解過程需要在40-50℃加熱20-30min。溶液室溫保存，不用冷藏。如有結(jié)晶析出，可以重新加熱后溶解，不影響使用。
2） HHBS Buffer(1X Hank’s Balanced Salt Solution with 20mM HEPES buffer, pH 7.2-7.4)或者其他生理緩沖液
B，儲存液和工作液（2×）準(zhǔn)備
1） 用無水DMSO溶解Cal-500 AM配制成2-5mM的儲存液，或?qū)⒁雅浜玫腃al-500 AM儲存液取出于室溫回溫。（如：若配制成4mM的母液，需向50µgCal-500 AM中加入12.3µl無水DMSO）。
【注①】：用DMSO重溶的Cal-500 AM是無色透明溶液。
2） 用含0.04% Pluronic F-127的HHBS或其他生理緩沖液將Cal-500 AM+DMSO儲存液稀釋到2-20µM染色工作液。
【注①】：添加一定量的20%Pluronic F-127溶液到Cal-500 AM+DMSO儲存液，使Pluronic F-127的濃度約為0.04%。Pluronic F-127可以防止AM探針在溶液中聚合并促使探針更好進(jìn)入細(xì)胞。但Pluronic F-127可降低AM探針的穩(wěn)定性，因此只建議在配制工作液時加入，不建議加入儲存液長期保存。
【注②】：Cal-500 AM應(yīng)用在大部分細(xì)胞的推薦加載濃度為4-5µM，具體的使用濃度需根據(jù)實驗要求進(jìn)行優(yōu)化。為了避免過度加載造成細(xì)胞毒性，建議在取得有效結(jié)果的基礎(chǔ)上盡量使用最di探針濃度。
【注③】：Cal-500 AM工作液需現(xiàn)配現(xiàn)用，避免反復(fù)凍存。
3） 【可選】如果細(xì)胞內(nèi)（比如CHO細(xì)胞）含有機陰離子轉(zhuǎn)運體，丙huang舒（Probenecid，1-2mM）可能需要加入上述染色工作液內(nèi)（在孔內(nèi)的最終濃度為0.5-1mM），以降低去酯化探針的泄露水平。
【注①】：我司提供多種丙huang舒：包括水溶性的丙huang舒（MZ8472-154MG），能降低有機溶劑的使用。
C，染色步驟（以下步驟僅做參考，用戶根據(jù)特定實驗需求做調(diào)整。）
1） 用生長培養(yǎng)基，過夜培養(yǎng)細(xì)胞；
2） 往細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi)加入等體積的2×染色工作液使其為1×。如果血清與藥物會有反應(yīng)或干擾，加入染料前，先將生長培養(yǎng)基更換成新鮮的HHBS。
3） 37℃孵育30-60min。
4） 吸掉染色工作液，并用HHBS或其他生理緩沖液（如有必要，使用含轉(zhuǎn)運體抑制劑如1mM丙huang舒的緩沖液）清洗細(xì)胞1~2次，以去除殘留探針。
5） 之后在HHBS或其他生理緩沖液（如有必要，使用含轉(zhuǎn)運體抑制劑如1mM丙huang舒的緩沖液）中，用合適的激發(fā)/發(fā)射波長來檢測熒光（見產(chǎn)品特性：Cal-500 AM的激發(fā)和發(fā)射光譜）。如有必要加入刺激劑，同時檢測熒光。
【注①】：對于熒光顯微鏡檢測，建議用DAPI濾片來檢測，建議用黑框/透明底的細(xì)胞培養(yǎng)板
【注②】：對于熒光酶標(biāo)儀檢測（要用帶自動液體處理系統(tǒng)比如FDSS、FLIPR或FlexStation），建議用激發(fā)波長：400nm，發(fā)射波長500nm，cut-off波長470nm來檢測，建議用黑框/透明底的96孔板；儀器設(shè)置：底部讀數(shù)且攜帶自動液體處理系統(tǒng)。
附錄ICal系列鈣離子探針的波長和鈣離子結(jié)合特性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 激發(fā)波長（nm） | 發(fā)射波長（nm） | 解離常數(shù)Kd（nM） |
Cal-520 | MX4537-50UG | 492 | 514 | 320 |
Cal-590 | MX4535-50UG | 558 | 584 | 561 |
Cal-630 | MX4536-50UG | 607 | 623 | 792 |
Cal-500 | MX4593-100UG | 388 | 482 | 303 |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
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